Rapid production de protéines recombinantes à partir de pools piggyBac stables de cellules CHO de transposon médiée

Des populations hétérogènes de cellules transfectées de façon stable (piscines cellulaires) peuvent servir pour la production rapide de quantités modérées de protéines recombinantes dans la biotechnologie. Ici, nous proposons l'utilisation du système piggyBac (PB) d'un transposon pour améliorer la stabilité de la productivité et à long terme des pools de cellules dérivées d'ovaire de hamster chinois (CHO). PB est un élément génétique d'origine naturelle qui a été conçu pour faciliter l'intégration d'un transgène dans le génome de la cellule hôte en biotechnologie. Dans ce rapport des groupes de cellules PB dérivés ont été générés après 10 jours de sélection avec la puromycine. Les groupes de cellules résultantes ont des productivités volumétriques qui étaient 3-4 fois plus élevé que ceux obtenus avec des groupes de cellules générées en biotechnologie par transfection de plasmide classique, même si le nombre de copies du transgène intégrées par cellule était similaire dans les deux populations. Dans les cultures par lots de 14 jours, les taux de protéine allant jusqu'à 600 et 800 mg / L ont été obtenus pour une protéine de fusion Fc et d'un anticorps monoclonal, respectivement, à des échelles volumétriques jusqu'à 1 L. En général, le rendement en protéine volumétrique à partir de pools de cellules restée constante pendant jusqu'à 3 mois en l'absence de sélection. En conclusion, la transfection de cellules CHO avec le système de transposon PB est une approche simple, efficace et reproductible pour la génération de groupes de cellules pour la production rapide de protéines recombinantes.